一、多功能净化柱+KRC光化学柱后衍生法

　　1 简介

　　多功能净化柱是由多种固相复合填料不仅包括大分子物质，更重要的是含有多种活性亲脂性(非极性)和带电(极性)物质，用来吸附各种酯类，叶黄素，化学物质，碳水化合物和蛋白质等干扰物。多功能净化柱+KRC衍生法就是利用PRIBOLAB公司的Pribofast 226/260多功能净化柱可以将Aflatoxins B1、B2、G1、G2很好的分离出来，然后用HPLC/FLD+KRC柱后衍生系统可以有效的测定Aflatoxins B1、B2、G1、G2含量。

　　2 多功能净化柱特点：

　　2.1 多功能净化柱可以简化样品提取、净化步骤，无需清洗和洗提。

　　2.2 可以实现多种毒素检测，有效降低检测成本;

　　2.3 HPLC+FLD+KRC衍生化，可以有效提高检测灵敏度，实现较低的检测限(Aflatoxins B1 0.05ppb);

　　2.4 光化学衍生操作简便，无需使用衍生试剂(通常电化学柱后衍生均需要使用衍生试剂，分析成本高，操作麻烦，仪器故障率较高);

　　2.5 一步法净化，回收率高达90%左右。

　　2.6 广泛适用于各类农产品：谷物、淀粉、动物饲料、食品、坚果、棉籽等。

　　3 多功能净化柱/KRC衍生法操作步骤简介：

　　3.1 提取样品：研磨粉碎、称重25g样品;用乙腈/水(84/16 V/V)混合样品，

　　高速均质 1 分钟。

　　3.2 过滤：将提取的样品定量滤纸过滤，收集滤液;

　　3.3 取4-6ml滤液快速通过 多功能净化柱PribofastM226 或Pribofast M260

　　3.4 收集过柱溶液，直接用于HPLC检测，KRC衍生化后直接记录Aflatoxins 浓度。

　　二、免疫亲和柱+KRC光化学柱后衍生法

　　1 简介

　　PribofastAflatoxins 总量免疫亲和柱可选择性吸附样品液中的毒素，从而对毒素样品起到非常针对性的纯化作用，然后用HPLC/FLD+KRC柱后衍生系统可以有效的测定Aflatoxins  B1、B2、G1、G2浓度，提高检测的准确性和灵敏度。

　　2 免疫亲和柱/KRC衍生法特点：

　　2.1 特异性很强使得样品净化效果;

　　2.2 使用免疫亲和柱操作架可以使样品净化快速，提高检测效率高

　　2.3 HPLC+FLD+KRC柱后衍生化，有效提高检测灵敏度，实现较低的检测限 (Aflatoxins B1 0.05ppb)。

　　2.4 衍生化操作方便，光化学衍生化无需使用衍生试剂(通常电化学柱后衍生均需要使用衍生试剂，分析成本高，操作麻烦，仪器故障率较高)。

　　2.5 回收率高，达到90%以上

　　3 免疫亲和柱法操作步骤简介：

　　3.1 提取样品：研磨、称重50g样品;用甲醇/水(80/20 V/V)混合物将样品

　　高速混匀 1 分钟。

　　3.2 过滤：将提取的样品滤膜过 玻璃纤维滤纸，

　　3.3 将回温的免疫亲和柱安装在泵流操作架进行过柱净化：经过PribofastAflatoxins 总量免疫亲和柱(IAC-010-3)活化、淋洗、洗脱三步骤，洗脱下来的溶液可直接用于HPLC检测;

　　3.4 测定：HPLC直接进样，经色谱柱、KRC光化学柱后衍生化后直接记录Aflatoxins 浓度;

　　三、酶联免疫法检测Aflatoxins 总量

　　1 采取直接竞争ELISA方法，利用酶标仪测定样品和标准品的样本的吸光值计算得到样品中Aflatoxins 素总量的含量。

　　2 试剂盒检测时间：15分钟+15分钟

　　3 检测限：0.1ppb

　　关于Pribofast KRC 柱后衍生器和 HPLC参数

　　●Pribofast KRC 柱后光化学衍生器 波长：254 nm

　　●HPLC-色谱柱： Aflatoxins 色谱柱150 x 4.6 mm; C-18

　　●流动相: 甲醇/水 (45/ 55 v / v)

　　●流量：1.0 mL/min 柱温： 30 °C

　　●进样体积：20μL

　　●荧光检测器：λ-激发波长：365 nm λ-发射波长：440 nm

　　●液相色谱仪需要配制：PriboLab公司Pribofast KRC 柱后光化学衍生器，含有1ml反应池，纳米灯管254nm

　　关于Aflatoxins 色谱柱：